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年龄依赖的乙型肝炎病毒小鼠模型的建立与应用
应用领域:Биология и новая медицина
我有意向
国家/地区
中国
行业领域
Биология и новая медицина
简介
1、技术原理:将来源于野生型Balb/C 小鼠的脾脏淋巴细胞回输给免疫缺陷的Rag-1-/-/HBV 小鼠,的确观察到与国际同行报道基本一致的结果,即在Rag-1-/-/HBV 小鼠中出现年龄依赖的病毒清除情况:成年小鼠表现清除病毒抗原,幼年小鼠表现为抗原持续表达。因此,本研究拟对免疫重建的条件进一步优化。对用于回输的野生型小鼠脾脏淋巴细胞的分离方法、细胞浓度,供体鼠年龄(成年与幼年),受体鼠的年龄(成年与幼年)进行优化。分别采用来自不同周龄的野生型小鼠的脾脏淋巴细胞回输给不同周龄的Rag-1-/-/HBV 小鼠。同时检测免疫重建后小鼠血清中转氨酶、HBsAg、HBsAb 和HBcAb 的水平的变化。根据对小鼠血清中HBsAg 的清除作用,确定成年Rag-1-/-/HBV 小鼠形成的急性乙型肝炎和幼年小鼠形成的慢性乙型肝炎小鼠模型建立的各种参数。2、性能指标:(1)完成了年龄依赖 Rag-1-/-/HBV 小鼠免疫重建参数优化与建立:(2)采用3周龄幼年Rag-1-/-/HBV 小鼠,根据模型建立优化的参数,选择免疫重建后6周时的HBsAg水平为重建前的50%以上的为模型,成模率达到70左右,每批次成模小鼠数为30 只左右。(3)分别检测来自急性乙型肝炎和慢性乙型肝炎小鼠模型的肝脏淋巴细胞:发现成年小鼠能清除HBsAg与其高水平的CD8T细胞和B细胞有关,同时约有部分小鼠产生HBsAb。幼年小鼠不能清除HBsAg,未能检测到HBsAb,与成年小鼠相比含有较低的CD8T细胞和B细胞有关。(4)年龄依赖的乙型肝炎小鼠模型的免疫耐受性类似临床慢乙肝病人(5)利用小鼠模型评价治疗性乙肝疫苗以及TLR7激动剂的抗病毒作用。
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