简介
我们从定性、定量分析层次确定了中药肿节风体外主要成分,并对其体内吸收成分进行较为系统研究。采用脂多糖刺激小鼠巨噬细胞经典免疫炎症模型,对典型炎症反应涉及指标因子(NO, iNOS, COX-2, TNF-α、IL-1β、IL-6 )测定进行活性筛选,并研究代表性成分/关键组分抗炎作用机理,探索工艺制备主要组分单体,对关键组分进行体内抗炎活性验证。结果:分析方面,建立液质联用分析方法同时测定肿节风中17个成分含量,通过对照品确认了大鼠灌胃给药后36个母体原形入血吸收成分,并研究了7个主要成分体内代谢规律,归属了含药血浆中23个非原形成分母体来源;抗炎活性研究方面,筛选到抗炎活性成分19个,并研究其主要I相代谢成分p-coumaric acid、原形吸收成分迷迭香酸苷,及药材关键组分(绿原酸+异嗪皮啶+迷迭香酸)对NF-kB/MAPK相关信号通路抗炎作用机理;我们还解决了肿节风中主要组分异嗪皮啶、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸单体体内代谢研究原料来源问题;采用LPS诱导小鼠急性肺损伤炎症模型对主要单体及组分进行了体内抗炎活性验证。本研究既从多成分、多靶点层次研究了肿节风主要抗炎成分,又找到了基于NF-kB/MAPK通路关键作用组分。我们采用基于整体观的、体内的、逐个靶点的中药药效组分简化研究思路,相对可行,应用到复方中药研究更有意义。找到复方中药对某一症或疾病整体作用的几个关键靶点,结合复方物药效质体外、体内研究结果,进一步找到各个靶点的关键作用组分,最后结合网络药理整合,整体验证,预期能解决复方中药研究中与药效物质基础研究相关的一系列问题。