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桑叶抑菌化合物的分离及抑菌作用机制研究
应用领域:Современное сельское хозяйство
我有意向
国家/地区
中国
行业领域
Современное сельское хозяйство
简介
目前,关于桑叶抑菌作用的物质基础及作用机制的研究结果还不尽统一,抑菌试验主要集中在对桑叶粗提物或极性部位抑菌谱的筛选,关于桑叶抑菌活性单体及其对蛋白质、核酸和脂质等生物大分子的微观代谢和调控表达的影响机制缺乏研究。因此,研究筛选桑叶抑菌活性单体化合物,鉴定单体化合物结构,对单体化合物进行抑菌活性评价和作用机制探索,以期揭示桑叶抑菌的物质基础、明确桑叶多酚抑菌的构效关系和作用机制,可望对桑叶抑菌作用的物质基础和作用机制获得新认识,研究结果亦可为桑叶“清热解毒”的中医学说和民间养生文化提供科学解释,对挖掘和利用桑树资源的食药用价值,指导桑树资源食药用途开发具有重要的理论和现实意义。本课题组前期研究基础上,通过优化HPLC色谱条件,建立了桑叶多酚指纹图谱。利用该技术对不同成熟度、不同采收季节、不同品种的桑叶中总多酚和单体酚类物质进行了分析,发现春季比夏季桑叶中多酚含量高、嫩叶比老叶中多酚含量高。通过抑菌试验对桑叶提取物和多酚单体化合物进行了筛选,得到了活性最强的多酚化合物Morusin。通过棋盘稀释试验,发现Morusin和芦丁,桑酮C和桑酮D之间有明显的协同效应。同时,对抑菌活性化合物的构效关系进行了初步分析,发现异戊二烯基取代基对化合物的抑菌活性尤其重要。最后从细菌生存能力、细菌细胞壁通透性、细菌微观结构、关键酶活性等方面对单体化合物Morusin的抑菌作用机制进行了探讨。发现Morusin能明显抑制金黄色葡萄球菌的生长,延缓细菌进入对数生长期的时间;能破坏细菌细胞壁的完整性,造成细菌胞内碱性磷酸酶的外泄和细菌培养液电导率的升高;通过扫描和透射电子显微镜观察发现经过Morusin作用后的金黄色葡萄球菌板结成团、细胞壁破损、细胞质外泄,进一步证实Morusin的抑菌活性可能是通过破坏细菌细胞结构而起作用。通过酶活性试验,证实Morusin的抑菌活性是通过FabI途径起作用的。
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